Sắc ký trao đổi ion – Tổng quan

2021 – 04-07 T22 : 42 : 27-04 : 00

https://blogchiase247.nethttps://blogchiase247.net/vi/tai-lieu/sac-ky-long-hplc/sac-ky-trao-doi-ion-tong-quan-113.htmlhttps://blogchiase247.net/uploads/tai-lieu/2021_04/hqdefault.jpg

https://blogchiase247.net/uploads/logo.gif

Sắc ký trao đổi ion ( IEC ) là một kỹ thuật nghiên cứu và phân tích quan trọng thường được sử dụng để phân tách và xác lập những ion và phân tử phân cực trên cơ sở ái lực của chúng so với chất trao đổi ion .Sắc ký trao đổi ion ( IEC ) là một kỹ thuật nghiên cứu và phân tích quan trọng thường được sử dụng để phân tách và xác lập những ion và phân tử phân cực trên cơ sở ái lực của chúng so với chất trao đổi ion .Sắc ký trao đổi ion là gì ? Sắc ký trao đổi ion ( IEC ) là một kỹ thuật nghiên cứu và phân tích quan trọng thường được sử dụng để phân tách và xác lập những ion và phân tử phân cực trên cơ sở ái lực của chúng so với chất trao đổi ion .

Sắc ký trao đổi ion là gì?

Sắc ký trao đổi ion ( IEC ) là một kỹ thuật nghiên cứu và phân tích quan trọng thường được sử dụng để phân tách và xác lập những ion và phân tử phân cực trên cơ sở ái lực của chúng so với chất trao đổi ion .

Ở đây, Pha tĩnh = Một loại nhựa ; Pha động = Chất rửa giải

Sắc ký trao đổi ion cùng với phân vùng / tương tác ion và sắc ký loại trừ ion là một thành phần quan trọng của sắc ký ion .

Sắc ký trao đổi ion hoàn toàn có thể vận dụng cho những phân tử tích điện khác nhau như protein lớn, axit amin và nucleotide nhỏ .

Nguyên tắc sắc ký trao đổi ion

Nguyên tắc phân tách dựa trên sự trao đổi thuận nghịch của những ion giữa những ion có trong mẫu và những ion có sẵn trong nhựa trao đổi ion. Chủ yếu, quy trình phân tách trao đổi ion diễn ra trong một cột được phủ bằng chất trao đổi ion .

Các dạng sắc ký trao đổi ion

Dựa vào điện tích trên những phối tử trao đổi ion, sắc ký trao đổi ion được chia thành hai loại chính :

Sắc ký trao đổi anion

Sắc ký trao đổi anion sử dụng nhựa trao đổi ion tích điện dương có ái lực với những phân tử điện tích mặt phẳng âm toàn diện và tổng thể .

Sắc ký trao đổi cation

Trong sắc ký trao đổi cation, nhựa trao đổi ion tích điện âm được sử dụng có ái lực với những phân tử có tổng điện tích mặt phẳng dương .

Sắc ký trao đổi cation vs anion :

 

Giống nhau

Khác nhau

Sắc ký trao đổi cation, cũng như sắc ký trao đổi Anion, hoàn toàn có thể được sử dụng cho cả mục tiêu điều chế và nghiên cứu và phân tích. Chúng cũng hoàn toàn có thể tách một số lượng lớn những phân tử từ axit amin và nucleotide đến những protein lớn .

Sắc ký trao đổi cation đa phần được sử dụng cho những protein có điện tích dương thuần ở pH dưới điểm đẳng điện của chúng được link. Mặt khác, sắc ký trao đổi Anion được sử dụng cho những protein có điện tích âm thuần ở pH trên điểm đẳng điện của chúng được link .

sắc ký trao đổi ion

Một sắc ký cột trao đổi ion điển hình bao gồm:

Máy bơm – Máy bơm cao áp được coi là một trong những bộ phận chính của mạng lưới hệ thống sắc ký trao đổi Ion giúp phân phối dòng chảy liên tục của dung dịch rửa giải .

Bộ tiêm mẫu – Trong số những cách khác nhau để đưa mẫu vào dòng dịch rửa giải và vào cột, chiêu thức đơn thuần nhất là sử dụng van bơm .

Cột – Tùy thuộc vào nghành nghề dịch vụ ứng dụng, một cột được chọn để tách hỗn hợp mẫu. Các cột được sử dụng trong phòng thí nghiệm được kiến thiết xây dựng từ thủy tinh trong khi những cột được sử dụng trong những ngành công nghiệp được sản xuất từ thép không gỉ hoặc polyme chất lượng cao .

Buồng gia nhiệt cột ( tùy chọn )

Đầu dò – Điều này ước tính những pic của chất nghiên cứu và phân tích dưới dạng dung dịch rửa giải từ cột

Hệ thống dữ liệu – Hệ thống này hỗ trợ việc thu thập và tập hợp các sắc đồ và dữ liệu.

QpVlUpYa8uOtcZ0n5m4HJhIWNPwJxd0U6GlHNELSum acoSzNoN69GE n vGlRFcni22xaejyK pk7BTOBB0cvvpJpTeEwWIuurROGmt8IX2kZqA7mx4qBbXMvO6JL tDQaSmDI

Hình: Sơ đồ hệ thống sắc ký trao đổi ion

Đóng gói cột – Quá trình phân tách trao đổi ion thường diễn ra trong những cột được đóng gói bằng chất trao đổi ion .

Các chất trao đổi ion được hình thành từ styren và divinylbenzen. Ví dụ về chất trao đổi anion là DEAE-cellulose trong khi ví dụ về chất trao đổi cation là CM-cellulose .

Ứng dụng của mẫu – Ngay sau khi cột được đóng gói, trên đỉnh của cột, dung dịch cần xác lập được đặt và được cho phép đi qua lớp của bộ trao đổi ion với sự trợ giúp của ống tiêm hoặc pipet. ;

Sự tăng trưởng của sắc ký đồ và sắc ký trao đổi ion rửa giải – Với sự tương hỗ của những pha động khác nhau như đệm photphat, đệm axetat, đệm pyridin, NaOH 1N, v.v., sắc ký đồ được tăng trưởng .

Có hai loại kỹ thuật rửa giải sắc ký trao đổi ion được sử dụng là :

Rửa giải đẳng dòng – Ở đây, axit hoặc kiềm hoặc chất đệm có độ bền tương tự như được sử dụng .

Rửa giải gradient – Lúc đầu, một pha động ít axit hơn hoặc bazơ được sử dụng. Sau đó, trong những khoảng chừng thời hạn đều đặn, có sự ngày càng tăng tính axit hoặc tính bazơ .

Phân tích dung dịch rửa giải hoặc Phát hiện – Xem xét thể tích hoặc thời hạn, những phần nhỏ khác nhau của dung dịch rửa giải được tích lũy và nghiên cứu và phân tích thành phần của chúng. Dựa trên thực chất và số lượng của những loài ion, một số ít chiêu thức nghiên cứu và phân tích được sử dụng như :

  • Quang phổ UV

  • Phương pháp đo độ dẫn

  • Phương pháp trắc quang ngọn lửa

  • Polarography ( Phân cực )

Trong sắc ký trao đổi ion, detector độ dẫn điện được coi là detector phổ cập và có lợi nhất. Cuối cùng, hiệu quả nhận được đã được bảo lưu .

Tái sinh – Sau khi tách, nhựa trao đổi ion hoàn toàn có thể không hiệu suất cao cho thí nghiệm tách tiếp theo nhưng không được thải bỏ vì giá tiền của nó. Do đó, điều quan trọng là phải kích hoạt lại, tái tạo nhựa đã qua sử dụng để làm cho chúng hoạt động giải trí hiệu suất cao như nhựa nguyên sinh .

Các ứng dụng của sắc ký trao đổi ion

Sắc ký trao đổi ion là một công cụ can đảm và mạnh mẽ và quan trọng so với những nhà hóa học nghiên cứu và phân tích dược phẩm .

Sắc ký trao đổi ion được sử dụng để ước tính và phân tách những phân tử có điện tích hoặc ion khác nhau gồm có protein, peptit, axit amin, vitamin, cacbohydrat, enzim, v.v … riêng của nó hoặc cùng với những kỹ thuật sắc ký khác .

Điều này cũng hoàn toàn có thể vận dụng để tách biệt và làm sạch những phân tử hữu cơ từ những nguồn tự nhiên .

Các phân tử khác nhau với hiệu suất lớn cũng được nghiên cứu và phân tích .

Các phân tử mong ước được tinh chế ở mức cao .

Với ngân sách thấp, kỹ thuật sắc ký trao đổi ion được vận dụng để chuyển giao cho những quy mô sản xuất .

Các loại sản phẩm tự nhiên hoàn toàn có thể chiết xuất không dung môi hoàn toàn có thể được theo dõi .

Nó đóng một vai trò quan trọng trong việc mày mò thuốc hiện đại để phân lập những mẫu sản phẩm tự nhiên .

 

Nhược điểm của sắc ký trao đổi ion là gì?

Thông qua sắc ký trao đổi ion, chỉ hoàn toàn có thể tách những phân tử tích điện .

Yêu cầu phải có dung dịch đệm

Trong sắc ký cột trao đổi ion, hiệu suất của cột kém

Sau khi sử dụng nhiều lần, rất khó để Dự kiến độ không thay đổi và năng lực tái tạo của cột

Đôi khi rất khó để trấn áp độ tinh lọc và độ phân giải

Rate this post